1、此染色液即為工作液，使用時直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養(yǎng)皿中以考馬斯亮藍(lán)染色液覆蓋凝膠，并緩慢搖動2h；
2、傾去染色液，用脫色液沖洗凝膠；
3、以脫色液覆蓋凝膠，緩慢搖動2h，傾去脫色液，再加入新脫色液進行脫色，直至獲得清晰的藍(lán)色的條帶和干凈的背景(通常此過程需要2～4h，也可脫色過夜至清晰的藍(lán)色的條帶和干凈的背景)；
4、對凝膠進行分析和照相，凝膠可放置在7%的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置(P2000)對凝膠進行處理后保存。安全性：含有甲醇，無特殊毒性，按一般化學(xué)品操作規(guī)程處理。
明膠酶譜法試劑盒的使用注意事項：
1、制備聚丙烯酰胺時應(yīng)注意排除氣泡。
2、明膠酶譜的活性受鈣離子，鋅離子，和PH值等因素的影響，因此緩沖液配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確，盡量用超純水，孵育溫度也掌握好。
3、用大梳子。
4、孵育液的PH在7.5-7.6，復(fù)性的TRITON時間長了會有絮狀物，所以實驗時盡量使用新鮮配置的。
5、孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中，因為會改變孵育液的PH值，在普通孵箱即可。
6、細(xì)胞樣本用PBS5倍體積震蕩裂解，估算細(xì)胞的體積，然后加入5倍體積的PBS，渦旋振蕩15-30s，而后靜置或低速離心或者手動震蕩。
更新時間：2022-10-24 
瀏覽次數(shù)：744
您的位置：